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RNA提取試劑在選擇時應考慮的幾個點?
發布時間:2020-04-22   點擊次數:463次
   RNA提取試劑在選擇時應考慮的幾個點?
  RNA提取試劑主要用于各種植物、動物、微生物的RNA提取,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。實驗者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。
  所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學后實驗。但較好的試劑盒價格比較貴,在實驗室可以根據自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。
  本產品提供了一種快速,簡單,經濟有效的方法,可從全血,哺乳動物細胞,細菌細胞和真菌細胞中分離總RNA。優化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。
  那我們在選擇RNA提取試劑的時候應考慮哪些因素呢?一起來看看下面的內容吧!
  一:操作簡便性
  操作簡便性也是拭子提取試劑選擇的一個重要因素。操作過于復雜,不僅費時費力,還容易導致樣本間的交叉污染,也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測或樣本量較多情況下的檢測,操作復雜如果導致交叉污染會引起誤診,還會影響出檢測報告的時間。因而,選用操作簡便、流暢的提取試劑盒非常重要。
  二:提取的核酸純度要高
  一般RNA 溶液OD260/OD280比值應在1.8--2.0之間,如果提取的RNA溶液OD260/OD280比值小于1.8,通常說明有蛋白質或酚、多糖等的污染。如果提取的RNA溶液OD260/OD280>2.0,則表明RNA有降解。不同品牌的試劑盒提取的RNA純度略有差別。
  三:考慮提取試劑中應含有較高的提取得率
  對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強、洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,裂解液和洗脫液沒有經過很好的優化,RNA提取試劑的提取得率就不高。至于RNA提取得率的確定,我們可以使用紫外分光光度法,但是不能作為判斷得率的標準,還是要做個PCR或熒光定量。
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